建構胡瓜嵌紋病毒於香蕉上逕行基因靜默

香蕉是世界上最重要的主食和經濟作物之一。 儘管在香蕉的基因體及轉錄組的研究上，已有許多報導，但由於香蕉為三倍體，且轉殖效率低，因此以傳統遺傳剔除及轉殖方式來研究香蕉基因之功能，依然十分困難。為了促進香蕉基礎及轉譯學之研究，我們以分離於香蕉之胡瓜嵌紋病毒（cucumber mosaic virus, CMV），CMV20分離株，開發成病毒誘導基因沉默（virus-induced gene silencing, VIGS）系統。我們把CMV 20基因體RNA 1,2和3，分別選殖於二為載體pJL89中，並在RNA2 2a 蛋白終止處設計限制酶切位，可將欲靜默之香蕉標目標基因插入切位。我們也在香蕉上開發了有效的農桿菌接種方法，可將我們實驗中CMV 20 VIGS載體之感染率提升至95％。以此VIGS系統進行香蕉之glutamate 1-semialdehyde aminotransferase (MaGSA) 及phytoene desaturase (MaPDS) 基因之靜默，我們可分別在香蕉上，觀察到對應的典型褪綠及白化表型，此VIGS系統能有效地將GSA和PDS的RNA別降低至對照的10％和18％。此VIGS系統能加速香蕉的功能基因組研究。
葉信宏

曾昱，李名綺，詹孝軒，邱乙書，涂翠琴，侯博瀚，陳荷明，周俊男，葉信宏* (2019) Scientific Reports, volume 9, Article number: 11553