利用韌皮部專一性啟動子產生髮夾ＲＮＡ增強番茄對抗番茄黃化捲葉泰國病毒之能力

RNA干擾(RNA interference, RNAi)已成功的應用於植物基因轉殖，來產生所需的性狀。然而，RNAi之效率在轉殖植株之間常產生差異，此外如何有效且快速將RNAi抗性應用於不同植物品種，仍極具挑戰性。在此研究中，我們針對兩種啟動子的轉錄活化RNAi能力進行評估，此兩種啟動子分別為花椰菜嵌紋病毒(cauliflower mosaic virus, CaMV) 的35S啟動子以及水稻東格魯桿狀病毒(rice tungro bacilliform virus, RTBV) 的韌皮部專一性啟動子。同時我們也透過分析RNAi 標誌基因，內源性谷氨酸-1-半醛氨基轉移酶(glutamate-1-semialdehyde aminotransferase gene, GSA)的性狀表現，以及對番茄黃化捲葉泰國病毒(tomato yellow leaf curl Thailand virus, TYLCTHV)之抗性來評估這兩種啟動子驅動RNAi之效能。由35S或RTBV啟動子驅動的GSA髮夾RNA (hairpin RNA)轉基因圓葉煙草顯示，與35S :: hpGSA相比，RTBV :: hpGSA能夠誘導更強的基因靜默，其子代之間也有更一致的靜默表型。分析35S :: hpTYLCTHV和RTBV :: hpTYLCTHV的轉基因圓葉煙草顯示，儘管35S :: hpTYLCTHV能比RTBV :: hpTYLCTHV產生較多的小片段RNA，但RTBV :: hpTYLCTHV轉基因植物對TYLCTHV的抗性優於35S :: hpTYLCTHV。將野生型(WT) 圓葉煙草接穗嫁接到TYLCTHV RNAi 轉基因圓葉煙草砧木上，可增強野生型圓葉煙草對TYLCTHV 之抗性，但未感染接穗只發現在野生型圓葉煙草接穗嫁接到RTBV :: hpTYLCTHV砧木; 但於圓葉煙草接穗嫁接到35S :: hpTYLCTHV或野生形砧木時，則未發現未感染接穗。 此研究可被廣泛的用來提升番茄對番茄黃葉捲曲病之抗性。
葉信宏

曾昱，張賀雄，塗翠琴，侯博瀚，陳荷明，邱乙書，周韋儀，張立，葉信宏* (2020) MPMI,