硝酸鹽的螢光生物傳感器nlsNiMet3.0使用手冊
2022年,何承訓博士帶領實驗室團隊於期刊Science Advances發表了第一個偵測植物體內硝酸鹽(NO3–)的螢光共振能量轉移(FRET)傳感器,(全文連結:https://www.science.org/doi/10.1126/sciadv.abq4915)。為了讓大家能夠更了解傳感器的使用方法以及應用的可能,今年(2023)八月已於Bio-protocol提供了NiMet3.0傳感器的實驗操作流程以及應用。
硝酸鹽(NO3–)是植物和動物的必要元素和營養物質。,但我們對於不同根細胞類型及其細胞組分中氮形式的分佈知識仍然有限。為了解決這個問題,我們開發了一種已細胞核定位且透過基因編碼所組成的螢光生物傳感器,不僅可逆且具有高度專一性,我們將其命名為nlsNitraMeter3.0。在此,詳細的介紹如何結合共焦顯微鏡等螢光成像系統,以細胞的層次將阿拉伯芥中硝酸鹽濃度和分佈視覺化以及定量。除了一步步帶領讀者如何從DNA構築到如何定量、計算以及解讀成像結果,也補充了需要注意以及可延伸的想法。透過本團隊開發出的工具能對植物生物學研究,尤其是氮元素的研究,能有所幫助。
(完整內容請見以下連結:https://bio-protocol.org/en/bpdetail?id=4743&type=0)
Yen-Ning Chen and Cheng-Hsun Ho* (2023) 硝酸鹽的螢光生物傳感器nlsNiMet3.0使用手冊 Bio-protocol, 13(16): e4743. DOI: 10.21769/BioProtoc.4743