Application of Cas12a and nCas9-activation-induced cytidine deaminase for genome editing and as a non-sexual strategy to generate homozygous/multiplex edited plants in the allotetraploid genome of tobacco
CRISPR基因編輯技術目前己廣泛利用在作物育種上。植物技術核心實驗室在2017年起進行相關的研究，目前在植物技術核心實驗室己可以利用SpCas9, SaCas9, FnCas12a, base editors等相關系統進行基因編輯 (Hsu et al. 2019). 編輯的路徑包括原生質體再生(Lin et al. 2018, Hsu et al. 2019), 以及農桿菌(Tong et al., 2019).與其他的實驗室常用農桿菌轉殖法不同，本實驗室是少數能以原生質體再生系統進行基因編輯。這個策略有很多的好處，除了可以使用Cas9-sgRNA 複合體進行無外源DNA的基因編輯以減少對環境的衝突，可以多Cas蛋白質應用減少載體上的限制，原生質體再生系統無需經有性生殖產生無外源同型結合之基因編輯植株(Hsu et al. 2019). 與南科蘭花轉殖實驗室合作，目前由本實驗室服務及開發之可編輯的作物包括阿拉伯芥，雲苔屬，秘魯番茄，菸草(Lin et al. 2018, Hsu et al. 2019), 及蝴蝶蘭(Tong et al. 2019).為能使更多研究學者能使用這個平台，我們將如何進行基因編輯之步驟(Yue et al. 2020)發表，研究人員可依這標準步驟進行實驗設計。
