茄子淹水逆境下抗壞血酸過氧化酶基因之選殖與表現分析
我們先前發現淹水造成茄子根部抗壞血酸過氧化酶的活性增加,本研究目的為選殖抗壞血酸過氧化酶基因,並測定淹水逆境下茄子不同組織抗壞血酸過氧化酶基因表現之調節情形。即時聚合鏈反應結果發現,茄子不同組織的表現圖譜顯示其變異性廣,其中以 EG117 淹水 72 小時之抗壞血酸過氧化酶轉錄子最多,每種組織與遺傳型之差異性表現直接與淹水逆境反應有關。在 NCBI 資料庫篩選並比較抗壞血酸過氧化酶的基因序列,根據番茄與馬鈴薯設計消退引子組 (degenerate primer sets),利用逆轉錄即時聚合鏈反應方法擴增茄子抗壞血酸過氧化酶的 cDNA,並以 5´ 與 3´ 快速擴增 cDNA 端技術完成全長之抗壞血酸過氧化酶 cDNA,cDNA 系的開放編閱架構 (open reading frame) 長度為 753 鹼基對,譯碼出細胞液之抗壞血酸過氧化酶,茄子抗壞血酸過氧化酶的序列與馬鈴薯、番茄、番椒與菸草的抗壞血酸過氧化酶序列分別有 96%、95%、93% 與 91% 的相似度;以 Neighbor-Joining 法作導譯胺基酸序列 (deduced amino acid sequence) 之演化分析,植物的 cAPXs 分為兩主群,茄子 cDNA 與馬鈴薯的親緣關係比番茄更近,南方墨點分析顯示茄子譯碼抗壞血酸過氧化酶的基因有兩套。這些結果顯示茄子的cAPX 可能與過氧化氫解毒有關,因此幫助克服淹水誘導之逆境。(Botanical Studies 2007, 48:25-34.)關鍵詞:抗壞血酸過氧化酶;即時聚合鏈反應;淹水;茄子;演化。
Lin, K.H., Lo, H.F., Lin, C.H.and Chan, M.T (2007) Botanical Studies, 48:25-34