臺灣重要蔬菜CRISPR 基因編基平臺之建置

Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR)/CRISPR Associated Protein 9 (Cas9)系統可以針對特定位置基因進行修改, 被視為作物育種上的新興工具. 為能快速了解修改的效果,植物原生質體可作為評估效率的有效平台。我們改善多種植物原生質體分離與轉殖技術。同時發展菸草單細胞分離與單細胞突變並再生為植株的方法。經轉殖含有Cas9和sgRNAs的載體至原生質體中，目標序列可藉由DNA增值檢測其突變效率。我們以菸草單一原生質體進行phytoene desaturase (NtPDS)基因突變並再生為植株。菸草白化再生植株經檢測後，4個NtPDS對位基因皆發生突變，且大多數的菸草突變株都沒有檢測到外源基因Cas9 DNA插入菸草基因體中。這個策略,可以得到不含外來基因的基因修飾多倍體植物, 未來可以應用在雜交多倍體作物的育種上.

 

同研究人員:林崇熙